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2016-07-28產(chǎn)品型號:
更新時(shí)間:2025-01-29
Mg 2+ -EGTA-ATP 酶測試盒
(貨號:A070-7 測魚肉樣本)
二、測定原理:
肌動(dòng)球蛋白及肌動(dòng)蛋白的ATPase很容易受到Ca 2+、Mg 2+、
EGTA、對氯汞基苯(PCMB)、離子強(qiáng)度及 pH 值的影響。因
此,選擇嚴(yán)格的條件來測定 ATPase 活性,可以反映出蛋白質(zhì)
特定的性質(zhì)。組成魚類肌肉蛋白質(zhì)的肌動(dòng)球蛋白和肌動(dòng)蛋白
在切斷 ATP 末端的磷酸基后生成 ADP 和無機(jī)磷酸。利用這一
點(diǎn),將生成的無機(jī)磷酸比色定量后可以表示 ATPase 活性。
三、樣本的前處理:
魚肉肌原纖維蛋白的提取:準(zhǔn)確稱取魚肉樣本,自然解凍,
剪碎。稱取碎肉 1g,加入 15mL 預(yù)冷的生理鹽水作為勻漿介
質(zhì)進(jìn)行勻漿,然后用 9500rpm 冷凍離心 30min,取上清液,
加入 3 倍預(yù)冷的雙蒸水,搖勻,再次用 9500rpm 冷凍離心
30min,棄上清液,留沉淀。用預(yù)冷的生理鹽水溶解,用力搖
勻,最后用 9500rpm 冷凍離心 20min,取上清液,即為肌原
纖維蛋白液。
四、規(guī)范操作步驟:
1、酶促反應(yīng):
六、測定意義:
ATP 酶 活 性 可 以 分 為 Ca 2+ -ATPase 活 性 、
Mg 2+ -ATPase 活 性 、 Ca 2+ -Mg 2+ -ATPase 活 性 和
Mg 2+ -EGTA-ATPase 活性。Ca 2+ -ATPase 活性是評價(jià)肌球
蛋白完整性的良好指標(biāo),Mg 2+ -ATPaSe 活性是在有內(nèi)源
性 Ca 2+情況下評價(jià)肌動(dòng)球蛋白復(fù)合體的完整性的指標(biāo),
Ca 2+ -Mg 2+ -ATPaSe 活性是在無內(nèi)源性 Ca 2+情況下評價(jià)肌
動(dòng)球蛋白復(fù)合體的完整性的指標(biāo),而Mg 2+ -EGTA-ATPase
活性則表明了原肌球蛋白-肌鈣蛋白復(fù)合體的完整性。因
此肌原纖維蛋白的 ATPase 活性常常作為評價(jià)肌動(dòng)球蛋
白完整性的指標(biāo),用于評價(jià)魚肉或魚糜蛋白的變性程度。
Mg 2+ -EGTA-ATP 酶測試盒