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以病毒為載體將外源基因?qū)肽切╇y以用質(zhì)粒-轉(zhuǎn)染試劑法轉(zhuǎn)染的細胞或組織,不僅效率高,而且有可能避免由于轉(zhuǎn)染試劑的毒性造成的假象,因此病毒轉(zhuǎn)染法在基因功能研究中正變得越來越重要了。在制備具有感染能力的病毒顆粒的過程中有幾個非常關鍵的步驟:其中一個就是將質(zhì)粒地轉(zhuǎn)入病毒包裝細胞(通常就是HEK293細胞系)。更高的轉(zhuǎn)染效率是更高的病毒滴度的基本保障。
ViraPackTM 轉(zhuǎn)染試劑盒經(jīng)StrataGENE非常的MBS哺乳動物轉(zhuǎn)染試劑盒改進而來,使用起來更為方便,用于AdEasy® XL腺病毒載體系統(tǒng),AAV(腺相關病毒)-無輔毒系統(tǒng)以及ViraPortTM反轉(zhuǎn)錄病毒系統(tǒng),也可用于慢病毒載體。
ViraPackTM 病毒轉(zhuǎn)染試劑盒:貨號#200488
試劑盒提供:2.5 M CaCl2, Solution,2x BBS (pH 6.95),改良小牛血清(MBS),對照質(zhì)粒,pCMV及β-gal
附:3 種病毒表達系統(tǒng)主要特點比較表
Stratagene的AAV、AdEasy,反轉(zhuǎn)錄病毒比較表
腺相關病毒系統(tǒng) | 腺病毒系統(tǒng) | 反轉(zhuǎn)錄病毒系統(tǒng) |
· 將外源DNA整合到宿主基因組中并穩(wěn)定表達 | ·高水平瞬時或短期表達 | ·將外源DNA整合到宿主基因組中并穩(wěn)定表達 |
· 可插入片段達3kb· 有綠色熒光蛋白載體 | ·可插入片段達7.5kb | ·提供綠色熒光蛋白載體 |
· 各種必需元件被構建在質(zhì)粒骨架上,不需要腺病毒共轉(zhuǎn)導 | ·免疫反應顯著減少,更適合基因治療應用 | ·轉(zhuǎn)染效率接近100% ·可以控制感染復數(shù)(MOI) ·可以用于構建cDNA表達文庫 |
· 在包裝細胞中因重組形成野生型AAV-2的風險大大降低 | ·在包裝細胞中因重組形成野生型腺病毒的風險略高 | ·病毒顆粒被分泌到培養(yǎng)上清中 |
· 宿主菌范圍廣 | ·宿主菌范圍廣 | ·宿主菌范圍廣 |
· 可以感染處于分裂期或非分裂期的哺乳動物細胞 | ·可以感染處于分裂期或非分裂期的哺乳動物細胞 | ·只能感染處于分裂期的哺乳動物細胞 |
· 滴度高達1011~1012病毒顆粒/ml | ·滴度高達1013病毒顆粒/ml | · |
· 用于基因治療等 | ·用于基因治療,疫苗開發(fā)等 | ·用于哺乳動物蛋白表達研究等 |
· #240071 · #240075 | ·產(chǎn)品編號#240010 | ·提供系列載體、表達系統(tǒng)及預制文庫產(chǎn)品 |
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